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液相色譜儀相關(guān)知識(shí)之進(jìn)樣器

更新更新時(shí)間:2021-11-17

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  早期使用隔膜和停流進(jìn)們器,裝在色譜柱入口處?,F(xiàn)在大都使用六通進(jìn)樣閥或自動(dòng)進(jìn)樣器。進(jìn)樣裝置要求:密封性好,死體積小,重復(fù)性好,保證中心進(jìn)樣,進(jìn)樣時(shí)對(duì)色譜系統(tǒng)的壓力、流量影響小。進(jìn)樣方式可分為:隔膜進(jìn)樣、停流進(jìn)樣、閥進(jìn)樣、自動(dòng)進(jìn)樣。
 
  1.隔膜進(jìn)樣。用微量注射器將樣品注入專門設(shè)計(jì)的與色譜柱相連的進(jìn)樣頭內(nèi),可把樣品直接送到柱頭填充床的中心,死體積幾乎等于零,可以獲得*的柱效,且價(jià)格便宜,操作方便。但不能在高壓下使用(如10MPA以上);此外隔膜容易吸附樣品產(chǎn)生記憶效應(yīng),使進(jìn)樣重復(fù)性只能達(dá)到1~2%;加之能碉各種溶劑的橡皮不易找到,常規(guī)分析使用受到限制。
 
  2.停流進(jìn)樣??杀苊庠诟邏合逻M(jìn)樣。但在HPLC中由于隔膜的污染,停泵或重新啟動(dòng)時(shí)往往會(huì)出現(xiàn)“鬼峰”;另一缺點(diǎn)是保留時(shí)間不準(zhǔn)。在以峰的始末信號(hào)控制餾分收集的制備色譜中,效果較好。
 
  3.閥進(jìn)樣。一般HPLC分析常用六通進(jìn)樣閥(以美國(guó)RHEODYNE公司的7725和7725I型zui常見(jiàn)),其關(guān)鍵部件由圓形密封墊子(轉(zhuǎn)子)和固定底座(定子)組成。由于閥接頭和連接管死體積在存在,柱效率低于隔膜進(jìn)樣(約下降5~10%左右),但耐高壓(35~40MPA),進(jìn)樣量準(zhǔn)確,重復(fù)性好(0.5%),操作方便。
 
  4.自動(dòng)進(jìn)樣。用于大量樣品的常規(guī)分析。
 
  進(jìn)樣方式有部分裝液法和*裝液法兩種。
 
  1、用部分裝液法進(jìn)樣時(shí),進(jìn)樣量應(yīng)不大于定量環(huán)體積的50%(zui多75%),并要求每次進(jìn)樣體積準(zhǔn)確、相同。此法進(jìn)樣的準(zhǔn)確度和重復(fù)性決定于注器取樣的熟練程度,而且易產(chǎn)生由進(jìn)樣引起的峰展寬。
 
  2、用*裝液法進(jìn)樣時(shí),進(jìn)樣量應(yīng)不小于定量環(huán)體積的5~10倍9zui少3倍),這樣才能*置換定量環(huán)內(nèi)和流動(dòng)相,消除管壁效應(yīng),確保進(jìn)樣的準(zhǔn)確度及重復(fù)性。
 
  使用和維護(hù)注意事項(xiàng):
 
 ?、贅悠啡芤哼M(jìn)樣前必須用0.45UM濾膜過(guò)濾,以減少微粒對(duì)進(jìn)樣閥的磨損。
 
 ?、谵D(zhuǎn)動(dòng)閥芯時(shí)不能太慢,更不能停留在中間位置,否則流動(dòng)相受阻,使泵內(nèi)壓力劇增,甚至超過(guò)泵的zui大壓力;轉(zhuǎn)到進(jìn)樣位時(shí),過(guò)高的壓力將使柱頭損壞。
 
 ?、蹫榉乐咕彌_鹽和樣呂殘留在進(jìn)樣閥中,每次分析結(jié)束后應(yīng)沖洗進(jìn)樣閥。通??捎盟疀_洗,或先用能溶解樣品的溶劑沖洗,再用水沖洗。
 
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