色譜填充柱采用和嚴(yán)格的填充技術(shù),確保了柱間的重現(xiàn)性和高柱效,而經(jīng)過處理的不銹鋼管線可以改善惰性和峰形。一般分為填充柱和毛細(xì)管柱,填充柱適合常規(guī)樣品的定量分析,尤其是高純度的樣品;毛細(xì)管柱適合分離組成比較復(fù)雜或微量樣品以及殘留分析等。目前來說,在常規(guī)樣品和高純樣品的定量分析時(shí),經(jīng)常使用的還是填充柱。
填充柱采用固體物質(zhì)作為固定相,包括具有吸附活性的無機(jī)吸附劑、高分子多孔微球和表面被化學(xué)鍵合的固體物質(zhì)。所用的填料是液體固定相,它是由惰性的固體支持物和其表面上涂漬的高沸點(diǎn)有機(jī)物液膜所構(gòu)成。定量分析的準(zhǔn)確度較高,特別是在某些領(lǐng)域(例如氣體分析、痕量水分析)具有*的用途。從發(fā)展上看雖然毛細(xì)管柱有逐步取代填充柱的趨勢(shì),但至少在目前一段時(shí)期內(nèi),色譜填充柱在日常分析中仍是一種十分有價(jià)值的分析分離手段。
該技術(shù)是經(jīng)過研究和多年生產(chǎn)實(shí)踐發(fā)展起來的。填裝均勻,密度適宜;固定液配比合理,涂布均勻。確保產(chǎn)品在正常的使用條件下具有更佳的穩(wěn)定性、分離性、使用壽命長。柱效受填充柱柱內(nèi)外因素影響,為使色譜柱達(dá)到理想效率,除柱外死體積要小外,還要有合理的柱結(jié)構(gòu)(盡可能減少填充床以外的死體積)及裝填技術(shù)。即使好的裝填技術(shù),在柱中心部位和沿管壁部位的填充情況總是不一樣的,靠近管壁的部位比較疏松,易產(chǎn)生溝流,流速較快,影響沖洗劑的流形,使譜帶加寬,這就是管壁效應(yīng)。這種管壁區(qū)大約是從管壁向內(nèi)算起30倍粒徑的厚度。在一般的液相色譜系統(tǒng)中,柱外效應(yīng)對(duì)柱效的影響遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于管壁效應(yīng)。
安裝:填充柱在進(jìn)樣器和檢測(cè)器兩處的安裝是類似的。色譜填充柱的進(jìn)樣器一端應(yīng)留出足夠的一段空柱(至少50mm),以防插入的注射器針觸到填在柱端的玻璃纖維或柱填充物;在檢測(cè)器一端,也應(yīng)留出足夠的一段空柱(至少40mm),以防噴嘴底端觸到填在柱端的玻璃纖維或柱填充物。