氣相色譜內(nèi)標法測定八角茴香油中茴香腦的含量
方法:采用氣相色譜內(nèi)標法,以萘為內(nèi)標,測定八角茴香油中茴香腦的含量。結(jié)果:茴香腦在4.12—32.96btg范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系,--y-~加樣回收率為96.28%,RSD=1.o9%。結(jié)論:氣相色譜內(nèi)標法簡便、準確,重現(xiàn)性好,可作為茴香油的質(zhì)量控制方法之一。
2.5 線性關(guān)系的考察分別精密吸取上述對照品溶液0.5、1、2、3、4ml,分別置10ml量瓶中,各精密加入內(nèi)標溶液2ml,以醋酸乙酯稀釋至刻度,搖勻,按上述色譜條件,各進樣lμl,進行測定。以茴香腦峰面積積分值和萘峰面積積分值的比值y對茴香腦進樣量 進行回歸分析,得回歸方程:Y:0.07509X一0.005997.r=1.0000。表明茴香腦進樣量在4.12—32.96μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。
2.6 校正因子的測定 精密稱取萘1.25g,置25ml量瓶中,加醋酸乙酯溶解并稀釋至刻度,搖勻,作為內(nèi)標溶液。精密稱取茴香腦對照品2.00g,置25ml量瓶中,加醋酸乙酯溶解并稀釋至刻度,搖勻,作為茴香腦對照品溶液。精密量取上述對照溶液和內(nèi)標溶液各2ml,置10ml量瓶中,加醋酸乙酯稀釋至刻度,搖勻,作為標準溶液。(即lμl含茴香腦16μg;含萘10μg)。取lμl注入氣相色譜儀,連續(xù)進樣6次,按平均峰面積計算校正因子,結(jié)果校正因子為1.3154,RSD=0.15%(n=6)。
2.7 精密度與重現(xiàn)性試驗取同一供試品溶液,連續(xù)重復(fù)進樣6次,以茴香腦峰面積積分值對萘峰面積積分值的比值計算相對標準偏差,測得平均值為1.2372, RSD =1.64% 。精密稱取同一批樣品6份,品溶液,依法進樣測定,以茴香腦的百分含量(g/g)計算相對標準偏差,平均含量為90.60% , RSD =0.15%。
2.8 加樣回收率試驗 精密稱取已測知含量的樣品(平均含量90.72%)0.09g于10ml量瓶中;分別精密加入茴香腦對照品溶液lml及內(nèi)標溶液2ml,以醋酸乙酯稀釋至刻度,搖勻。精密吸取1 l進樣測定,計算回收率,平均回收率96.28% ,RSD=1.09%(n=5)。
2.9 樣品測定按“校正因子測定及供試品溶液的制備”項下操作制備校正因子及樣品溶液,然后分別精密吸取校正因子溶液1 l連續(xù)進樣3次,測定校正因子;精密吸取供試品溶液ltal,進樣測定2次,以內(nèi)標法計算樣品中茴香腦的百分含量(g/g),各約0.18g,按2.4項方法制備供試 結(jié)果見表1。表1 樣品含量測定結(jié)果 (n=2)
3 討論
目前茴香腦的含量多采用氣相色譜面積歸一法測定其相對含量,具有一定的局限性,由于氣相色譜法進樣量少,采用內(nèi)標法可減少實驗誤差。提高方法的重現(xiàn)性,本研究結(jié)果表明,氣相色譜內(nèi)標法簡便、準確、重現(xiàn)性好,可為八角茴香油及其制劑的質(zhì)量控制方法提供參考。