每天用足夠的時(shí)間來平衡色譜柱,您就會(huì)在處理問題方面獲得的"補(bǔ)償",而且您的色譜柱的壽命也會(huì)變得更長(zhǎng)!------ 一定得做!
新的色譜柱在使用之前應(yīng)該在您自己的液相色譜儀上進(jìn)行性能測(cè)試,即使用色譜柱附帶的檢驗(yàn)報(bào)告上測(cè)試條件和樣品來測(cè)定該色譜柱的柱效。并且,在以后的使用中,應(yīng)時(shí)常對(duì)色譜柱進(jìn)行測(cè)試。
平衡色譜柱
反相色譜柱在經(jīng)過出廠測(cè)試后是保存在乙腈/水中的。請(qǐng)一定確保您所使用的流動(dòng)相和乙腈/水互溶。由于色譜柱在儲(chǔ)存或運(yùn)輸過程中可能會(huì)干掉,因此在用流動(dòng)相分析樣品之前,應(yīng)使用10-20倍柱體積的甲醇或乙腈平衡色譜柱;如果您所使用的流動(dòng)相中含有緩沖鹽,應(yīng)注意用純水"過渡"。
硅膠柱或極性色譜柱在經(jīng)過出廠測(cè)試后是保存在正庚烷中的。如果該色譜柱需要使用含水的流動(dòng)相,請(qǐng)?jiān)谑褂昧鲃?dòng)相之前用乙醇或異丙醇平衡
如何平衡色譜柱?
平衡過程中,將流速緩慢地提高用流動(dòng)相平衡色譜柱直到獲得穩(wěn)定的基線(緩沖鹽或離子對(duì)試劑度如果較低,則需要較長(zhǎng)的時(shí)間來平衡)
色譜柱的再生
進(jìn)行色譜柱再生時(shí),應(yīng)使用一個(gè)謙價(jià)的泵,我們建議不使用您的液相色譜儀上的泵。
建議用來沖洗的溶劑體積
注意:
在對(duì)NH2改性的色譜柱進(jìn)行再生時(shí),由于NH2可能成銨根離子的形式存在,因此應(yīng)該在水洗后用0.1M的氨水沖洗,然后再用水沖洗至堿溶液*流出。
**如果簡(jiǎn)單的有機(jī)溶劑/水的處理不能夠*洗去硅膠表面吸附的雜質(zhì),用0.05M稀硫酸沖洗非常有效。
色譜柱的維護(hù)
1.使用預(yù)柱保護(hù)分析柱(硅膠在極性流動(dòng)相/離子性流動(dòng)相中有一定的溶解度)
2.大多數(shù)反相色譜柱的pH穩(wěn)定范圍是2-7.5,盡量不超過該色譜柱的pH范圍
3.避免流動(dòng)相組成及極性的劇烈變化
4.流動(dòng)相使用前必須經(jīng)脫氣和過濾處理
5.如果使用極性或離子性的緩沖溶液作流動(dòng)相,應(yīng)在實(shí)驗(yàn)完畢柱子沖洗干凈,并保存大乙腈中
6.壓力升高是需要更換預(yù)柱的信號(hào)
卡套柱的安裝(不加預(yù)柱)
1.將卡套架套入柱芯
2.將兩片夾套片嵌入柱芯的凹槽,使柱芯高于夾套
3.將已套到柱芯上的卡套架向上推,直至高過夾套片
4.將卡套帽和卡套架旋在一起,然后用手?jǐn)Q緊
5.然后依同樣的順序連接好柱子的另一端
6.連接到液相色譜儀,PEEK接頭手?jǐn)Q即可;若為不銹鋼接頭應(yīng)使用扳手
注意:使用卡套柱時(shí),兩端的卡套應(yīng)時(shí)刻連接在柱芯上。不管您是平衡色譜柱或是清洗,任何時(shí)候都不能將卡套取下來,否則會(huì)造成填料的流失。
卡套柱的安裝 (加預(yù)柱)
1.將卡套架套入柱芯
2.將兩片夾套片嵌入柱芯的凹槽,使夾套高于柱芯
3.將已套到柱芯上的卡套架向上推,直至高過夾套片
4.將"字彈頭"預(yù)柱放入卡套片內(nèi)
5.將卡套帽和卡套架旋在一起,然后用手?jǐn)Q緊
6.然后依同樣的順序連接好柱子的另一端
總而言之
1)柱子在任何情況下不能碰撞、彎曲或強(qiáng)烈震動(dòng);
2)當(dāng)柱子和色譜儀連接時(shí), 閥件或管路一定要清洗干凈;
3)要注意流動(dòng)相的脫氣;
4)避免使用高粘度的溶劑作為流動(dòng)相;
5)進(jìn)樣樣品要提純;
6)嚴(yán)格控制進(jìn)樣量;
7)每天分析工作結(jié)束后,要清洗進(jìn)樣閥中殘留的樣品;
8)每天分析測(cè)定結(jié)束后,都要用適當(dāng)?shù)娜軇﹣砬逑粗?br />
9)若分析柱長(zhǎng)期不使用,應(yīng)用適當(dāng)有機(jī)溶劑保存并封閉;