液相色譜儀是分析工作者常用的一種儀器,以液體為流動(dòng)相,采用高壓輸液系統(tǒng),將具有不同的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動(dòng)相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內(nèi)各成分被分離后,進(jìn)入檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè),從而實(shí)現(xiàn)對(duì)試樣的分析。該方法已成為化學(xué)、醫(yī)學(xué)、工業(yè)、農(nóng)學(xué)、商檢和法檢等學(xué)科領(lǐng)域中重要的分離分析技術(shù)應(yīng)用。
它可以滿足常規(guī)實(shí)驗(yàn)室純化制備,并可根據(jù)使用需要,搭配紫外檢測(cè)器組成等度系統(tǒng),高壓二元梯度系統(tǒng),實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室制備提取。只要求樣品能制成溶液,不受樣品揮發(fā)性的限制,流動(dòng)相可選擇的范圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質(zhì)。與試樣預(yù)處理技術(shù)相配合,HPLC所達(dá)到的高分辨率和高靈敏度,使分離和同時(shí)測(cè)定性質(zhì)上十分相近的物質(zhì)成為可能,能夠分離復(fù)雜相體中的微量成分。
液相色譜儀的作用:
1、分離分析藥物的組分含量:由于一種藥劑常含有多組分,一次即可將各維生素B6、D1、A、E同時(shí)分離并定出含量。
2、測(cè)定藥物在各種器官中的代謝產(chǎn)物,特別是研究藥物的代謝產(chǎn)物在血清中存在的情況。如測(cè)血清中的酮酸及戊二酸。測(cè)尿中代謝產(chǎn)物更為方便,不需要繁鎖的預(yù)處理。
3、分析藥物在體內(nèi)的殘量:這是近來研究新藥效能很主要的內(nèi)容之一。
4、在藥物生產(chǎn)中進(jìn)行中間控制:生產(chǎn)抗菌素時(shí),先要了解發(fā)酵液中的主體與付產(chǎn)物的存在情況。例如一些發(fā)酵產(chǎn)物,均可用C18柱和甲醇及緩沖液配制的流動(dòng)相或用離子對(duì)法,分析主體及其收產(chǎn)物的含量??蛇M(jìn)行主體含量的測(cè)定,可測(cè)定主體含量及其降解產(chǎn)物,以便保證藥物的熱量。