液相色譜儀是一種分離技術,是使用制備色譜柱從混合物中提取目標化合物的一種分離純化技術。與其他的色譜分離方法,如薄層色譜法相比,現(xiàn)代制備液相色譜法具有柱效高、分離速度快等特點,是制備純化天然產(chǎn)物和化學合成產(chǎn)物的好手段。
色譜是一種分離技術,根據(jù)不同物質在流動相和固定相的分配比不同,而將物質分離的技術,因為最早用于分離色素,因而成為色譜。液相色譜顧名思義就是流動相為液體的色譜。相比于GC來說,液相色譜的優(yōu)點在于不需要高溫使樣品氣化,因而可以分離許多熱不穩(wěn)定的樣品,而且分離結果是溶液,方便收集和處理,可以用于制備級別的分離。普通液相色譜的缺點在于柱效低,分離效果差,而高效液相色譜使用高效率的色譜柱,提高了分離效果。
液相色譜儀的分離原理是:溶于流動相中的各組分經(jīng)過固定相時,由于與固定相發(fā)生作用(吸附、分配、排阻、親和)的大小、強弱不同,在固定相中滯留時間不同,從而先后從固定相中流出。又稱為色層法、層析法。
當流動相中攜帶的混合物流經(jīng)固定相時,其與固定相發(fā)生相互作用。由于混合物中各組分在性質和結構上的差異,與固定相之間產(chǎn)生的作用力的大小、強弱不同,隨著流動相的移動,混合物在兩相間經(jīng)過反復多次的分配平衡,使得各組分被固定相保留的時間不同,從而按一定次序由固定相中流出。與適當?shù)闹髾z測方法結合,實現(xiàn)混合物中各組分的分離與檢測。